程颖：循环细胞在小细胞肺癌流行病学中的进展

反向蛋白质( Circulating tumor cells，CTCs)作为一种可替代原发的“液体活检新种”，已在分散性肺癌、癌和结癌中所用于病状评价。小蛋白质肺炎(Small celllung cancer，SCLC)一个组织新种来源不明极低，且依赖理论上的受控入院分散和预测病状的生物遥相呼应。近年来学者CTCs在SCLC中所的外科各个领域同步进行了探索性分析，注意到CTCs对SCLC的病因、仍须，受控入院、分散，风险评估、病状以及建立核心内容放射治疗建议等具备最重要象征意义，本文就CTCs在SCLC外科各个领域中所的分析十分困难予以综述。

一、SCLC病变CTCs的测定原理则

CTCs的测定原理则主要有流式蛋白质测定高效率( fluocytometry，FCM)、逆转录一蛋白酶链反应(reverse-transcriptionPCR，RT-PCR)、CellSearch系统、CTC集成电路(CTC-chip)高效率和薄膜滤过除去蛋白质高效率(isolation by size of epithelial tumor cells．ISET)等，其中所CellSearch系统因其半自动化的操控该平台，较高的抗体、危险性和可重复性，成为最不常各个领域的CTCs测定原理则。

早在2004年，Allard等率先各个领域CelISearch法则测定了99可有肺炎（未列举SCLC可有数）病变的CTCs，随后Nagrath等采用CTC-chip法则测定了55可有肺炎病变则有滴C TCs。2009年在此之后的分析多采用CeIISearch法则测定SCI．C病变则有滴CTCs，然而该原理则由于对依赖上皮蛋白质特征的蛋白质会出现漏检确实，且与免疫磁珠及抗体结合的CTCs无法则行某些紧接著的测定，外科各个领域受到受限。

近年来，随着纳米科技的其发展，抑制剂CTCs表面遥相呼应的抗体辨认分f标记的纳米材料结合微流控高效率的CTCs测定该平台的分析受到相当多高度重视，2013年，《自然》（Nature）时尚杂志将CTCs纳米测定选为最具创新者和转化潜力的病因新原理则，成果令人瞩目。但就现今来看，原先的CTCs测定原理则各有利弊，未有分析证实哪种原理则对SCLC的CTCs测定愈来愈有优势。着眼未来会，全面性技术开发抗体、危险性愈来愈高的CTCs测定高效率，为SCLC的基础和外科分析造成了更是。

二、CTCs在SCLC外科各个领域中所的分析现状

（一）CTCs枚举与SCLC的病因、仍须

近年来多项分析显示CTCs枚举程度与SCLC的病因、仍须有紧密联系0 2009年Tanaka等各个领域CeIISearch法则测定了1 50可有7.5ml则有滴CTCs，其中所肺炎1 25可有、非恶性25可有，肺炎病变还包括116可有非小蛋白质肺炎(non-small cell lung cancer，NSCLC)和9可有SCLC。

分析整体而言SCLC病变CTCs特征性率为66.70-/0（6可有／9可有），相对来说大于NSCLC病变的CTCs特征性率(腺癌25.9%，鳞癌40.9%；腺癌对比SCLC，P

次年，Hou等各个领域CeIISearch法则测定了50可有初治的SCLC病变则有滴CTCs，还包括20可有受限期SCLC (limited disease，LD-SCLC)病变和30可有相当多期SCLC(extensive disease，ED-SCLC)病变，较宽期ED-SCLC及LD-SCLC病变的中所位CTCs枚举共有237和2个/7.5ml滴，7可有未检出CTCs的病变外为LD-SCLC，证明CTCs枚举程度与SCLC仍须总体。

类似的结论在2012年被日本学者Naito等证实，学者在51可有SCLC病变中所立用CeIISearch法则测定较宽期CTCs程度，整体而言ED-SCLC,病变的中所位CTCs枚举为9.5个f 7.5ml滴，而LD-SCLC仅为1个／7.51111滴，进一步证明ED-SCLC病变的CTCs程度大于LD-SCLC病变。

（二）CTCs风险评估SCLC的及病状

CTCs否可作为风险评估SCLC和病状的有救指称f,匙学者们仍然在探究的缺陷。Houi等在2009年通过CellSearch法则测定了50可有SCLC病变(LD-SCLC20可有，ED-SCLC30可有)的CTCs，注意到CTCs>300个/7.5ml滴的病变及CTCs

较宽期CTCs>=50和

在该分析中所SCLC病变的病状指明参数原作8个/7.5ml滴，用意将病变总称CTCs>=8及

Hiltermann等在2012年除此以外各个领域CellSearch法则测定59可有SCLC病变在较宽期、1等待时间尺度疗程后及4等待时间尺度疗程告一段落后外固滴CTCs程度，其中所ED-SCLC病变38可有，LD-SCLC病变2 1可有c较宽期有43可有病变(730-/o)CTCs≥2个/7.5ml滴，CTCs>215个/7.5ml滴和CTCs

经过1等待时间尺度疗程后病变CTCs程度相对来说降低，且1等待时间尺度疗程后CTCs

学者推断出CTCs程度是SCLC病状的独立影响因子，其中所1等待时间尺度疗程后CTCs程度是SCLC和病状最强的预测因子。

2013年ASCO公开发表的ECOG1508分析中所，学者更进一步在155可有ED-SCLC中所转为抑制剂放射治疗，并对其中所123可有病变较宽期CTCs同步进行测定，整体而言抑制剂放射治疗未能更长ED-SCLC病变的PFS和OS，但注意到较宽期CTCs≤l00和CTCs>100个／7.5ml滴的mPFS共有4.4和4.3个年底（P=0.07），OS共有10.7和7.2个年底(P=0.01)。学者认为虽然抑制剂放射治疗没法能提高ED-SCLC病变的PFS和OS，但却注意到了CTCs确实是SCLC病变的病状遥相呼应。

未来会，Igawa等更进一步各个领域OBP-401试验中测定SCLC病变则有滴CTCso各个领域OBP-401试验中测定肺癌和癌症病变CTCs的总体分析已有前期报道。分析纳入30可有韧治的SCLC病变，29可有病变(96%)则有滴CTCs特征性。在较宽期，21可有病变CTCs

（三）CTCs受控SCLC的入院和分散

原先的分析断定通过测定CTCs的出现来受控SCLC的入院和分散具备最重要的外科象征意义o Tanaka等分析注意到CTCs程度‘j 125可有肺炎病变（还包括9可有SCLC病变）十分困难相对来说总体，之外是与高处分散密切（AUC-ROC 0,873 p

基于这些数据，作者认为CTCs可作为受控肺炎高处分散的生物标记物。Natio等分析注意到SCLC在较宽期、放射治疗告一段落后及入院后CTCs的特征性率共有68.6%、26.5%和67.6，提醒SCLC入院后则有学CTCs程度升高，发生高处分散肌肉组织的数为0、1和>=2的病变其中所位CTCs枚举共有2.0、7.5和21个/7.5ml滴,提醒CTCs程度与高处分散肌肉组织的数有关，高处分散越多多，CTCs枚举越多高（p

三、CTCs在SCLC外科各个领域中所的探索一段距离

入院和分散是所致病变放射治疗挫败和死亡的主要原因，立即注意到的入院和分散并采敢积极理论上的放射治疗措施可显著提高病变生存率。然而，由于SCLC依赖必需要受控入院和分散的生物遥相呼应，且不常规MRI检测无法则注意到微分散灶及微小残留病灶，所致发生入院和分散的SCLC病变不可立即接受病因和放射治疗。

外科中所以外LD-SCLC的病变病状差异较大，提醒有些受限期的病变在病因时确实已发生了MRI不可注意到的微分散而成为潜在的相当多期病变。通过测定则有滴CTCs的出现及数变动从而对SCLC病变体内状况同步进行可实现、动态地受控和评价，立即注意到的入院、分散，将有助于外科药剂师对放射治疗急于的把握和放射治疗策略的除此以外，但其实CTCs的数或变动参数为多多于时必需要精确反映SCLC的入院或分散尚为不清楚，需要要愈来愈多的循证自然科学证据予以支持者。

CTCs在风险评估SCLC病变放射治疗总体的各个领域尚为受制于探索前期，放射治疗全过程中所CTCs数的变动与SCLC病变疗程的总体性及其与SCLC病变放疗急于的除此以外等缺陷在未来会需要大量的外科分析。近5年，对CTCs否可作为SCLC病变病状加权的分析慢慢地增多，但SCLC最佳的病状CTCs指明参数尚为无确切，争议多有。

其中所3项来自Hou、Naito、Hiltermann的分析将SCLC的病状CTCs揾定参数分别原作为50、8和2个／7.5ml滴，差异较大，这确实与分析采用的数据系统性原理则并不相同以及入组样本量较多于有关。未来会意大利学者Normanno等主张将ED-SCLC和LD-SCLC病变拆成分析，对较宽期、l等待时间尺度疗程后CTCs以及放射治疗前后CTCs的变动参数分别原作病状指明参数，为未来会的分析给予了在此之后思路。笔者所在的科研团队也正致力于我国SCLC病变病状最佳CTCs指明参数的分析，结果令人期盼。

的核心内容放射治疗是放射治疗来同步进行的其发展一段距离。SCLC病变对疗程抑制剂的反应存在相对来说的个体差异，其主要原因确实与复杂的异质性、线粒体差异及多态性有关。所以，逐步明晰SCLC的线粒体学特征对实现或许象征意义上的SCLC核心内容放射治疗尤为最重要。未来会我国学者王洁等分析医务人员通过各个领域单蛋白质基因化学合成暴力手段对病变单个CTC同步进行以外线粒体、位点线粒体化学合成。

在此项分析中所，谢晓亮研究员发明的多重退火和加成反应反向的逐次高效率(MAIBAC)，最终实现了对病变则有滴单个CTC的以外线粒体逐次和厚度化学合成，在单个蛋白质程度探测以外线粒体基因拷贝数变异(CNVs)和单核苷酸变异(SNVs)o单蛋白质程度CTCs线粒体化学合成高效率可立即给予如乙型肝炎基因突变等核心内容放射治疗所需要的最重要信息，同时也为未来会SCLC抑制剂抑制剂的技术开发给予高效率支持者。

SCLC一个组织新种难以获取，限制了紧接著各项检测和分析的同步进行，而透过CTCs构建的SCLC反向蛋白质重制肿( CTC-derived explants，CDXs)假设，再一妥善解决这一头疼难题。未来会，Hodgkinson等更进一步将6可有ED-SCLC病变lOml则有滴中所的CTCs提取后注射到狂犬病小鼠肺部，结果在4只小鼠身上转变成了CDXs，证明SCLC病变的CTCs具备致肿性。

同时各个领域CelISearch法则测定这6可有SCLC病变的CTCs，整体而言最终转变成CDXs的4可有病变的CTCs枚举外>400个／7.5ml滴，而另外2可有未转变成CDXs的病变其CTCs枚举共有222和20个／7.5ml滴，提醒SCLC的CTCs致肿性与则有滴CTCs教量有关。进一步系统性注意到相对来说于疗程危险性SCLC，疗程乙型肝炎性SCLC病变的CDXs倍增等待时间粗、生长愈来愈迅速。对3可有CDXs赋予顺铂和充分利用泊苷疗程抑制剂，其危险性顺序为CDX3>CDX2>CDX4，相应病变的OS共有9.7.3.5.0.9个年底，提醒对CDXs同步进行排泄药敏试验中可以间接反应病变生存等待时间。

该分析显示以外SCLC的则有滴CTCs具备干蛋白质功能性，可同步进行排泄培养出来、转变成与原发相对类似的CDXs，为SCLC病变的排泄药敏试验中、乙型肝炎机制系统性等一系列检测和分析给予了必需要的一个组织，妥善解决了SCLC病变新种来源不明极低的缺陷。

结论

从现行的分析可以显现出，虽然CTCs在SCLC中所的外科各个领域仍受制于探索前期，但脆弱性空旷。现今，诸多转化性分析早就同步进行中所，相信随着分析的不断深入，CTCs再一成为SCLC的机遇，期盼CTCs在SCLC的各个领域中所为我们造成了令人兴奋。

编辑： 喜